原生质体纯化步骤大致有如下几步（）。①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r/min离心15min.用吸管谨慎地吸去上清液。②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中（除不含酶外，其他成分和酶液相同），再次离心，去上清液，如此重复三次。③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生 质体的培养密度为104~106/ml。

A.①②③④
B.②⑧①④
C.③①②④
D.③②①④